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Orientador(a): Bruna Agy Loureiro
Instituição: Universidade Federal da Bahia
Trabalho Classificado na 10ª Edição (2024) do Prêmio de Pesquisa PremieRpet®.
Índice
Resumo
O uso de farinha de mosca soldado negro em dietas para animais de estimação está ganhando aceitação. Objetivo deste estudo foi avaliar o uso de farinha desengordurada de larva de mosca soldado negra (BSFL) e seu impacto nos parâmetros sanguíneos, marcadores bioquímicos, capacidade antioxidante orgânica, função de barreira cutânea e qualidade da pele e pelagem em cães. Duas dietas foram avaliadas em cross-over, com oito cães Beagles e dois períodos de 50 dias cada, com período de washout de sete dias entre eles. No estudo foram avaliadas duas dietas extrusadas isonutritivas, a primeira contendo 29,5% de farinha de BSFL e uma dieta controle com composição semelhante, mas contendo 26% de farinha de vísceras de aves (SPA) como fonte proteica. Antes do início e ao final de cada período, os cães foram submetidos à avaliação da pelagem e coleta de sangue para avaliação dos parâmetros do objetivo do estudo. A função da barreira cutânea foi avaliada pela medição da perda de água transepidérmica (TEWL) e da hidratação do estrato córneo (SCH) na região abdominal e pavilhão auricular dos cães nos dias 0, 15, 30 e 45 de cada período. Uma redução significativa na capacidade de eliminação de radicais foi encontrada com a dieta SPA no ensaio DPPH (p=0,008). Quando alimentados com dieta SPA, cães apresentaram aumento de triglicerídeos séricos e diminuição dos níveis de LDL após 50 dias de consumo, enquanto cães alimentados com BSFL apresentaram redução significativa de ALT (p>0,05). A TEWL foi significativamente reduzida em ambos os locais do corpo ao longo do tempo quando os cães foram alimentados com BSFL, enquanto o aumento do SCH foi observado no mesmo período, indicando melhor capacidade dos cães de reter água e manter a umidade da pele. A melhoria da função da barreira cutânea pode estar relacionada ao conteúdo de ácido láurico na dieta BSFL e ao aumento dos lipídios sebáceos na pele; responsável por evitar a perda de água da pele e melhorar a proteção contra danos microbianos. A inclusão de BSFL como principal fonte de proteína na dieta para cães não promoveu alterações negativas na bioquímica sanguínea e teve menor efeito antioxidante em cães saudáveis, no entanto, foi eficaz para melhorar a função e a qualidade da barreira cutânea.
Introdução
Devido a aceitação crescente das rações comerciais à base de insetos para pets, destaca-se a farinha da larva de mosca soldado negro (BSFL) como uma fonte promissora de proteínas e lipídeos, além de componentes bioativos como ácido láurico, quitina e peptídeos antimicrobianos, os quais já apresentam evidências científicas comprovadas (Veldkamp et al., 2022). Estudos in vivo e in vitro sugerem que dietas com BSFL podem oferecer atividade antioxidante e antimicrobiana, bem como serem úteis para animais com intolerâncias alimentares (Lei et al., 2019; Mouithys-Mickalad et al., 2020; Dong et al., 2021; Santos Neto et al., 2023). Porém, a segurança e validação dessas alegações ainda necessitam de mais evidências, com potencial para expandir o mercado de alimentos para animais de estimação à base de BSFL. Com isso, objetivo deste estudo foi de avaliar o impacto das dietas com a inclusão da farinha da BSFL nos parâmetros sanguíneos, na capacidade antioxidante orgânica e na qualidade da pele e pelagem de cães adultos e saudáveis, buscando corroborar algumas dessas afirmações.
Material e métodos
O estudo foi aprovado pelo Comitê de Ética no Uso Animal (CEUA) (Protocolo nº 3149030322). Oito cães fêmeas da raça Beagle foram selecionados, com média de idade de 3,2±1,4 anos, peso corporal de 10,9±1,4kg e escore de condição corporal de 5,2±1,9 na escala de 9 pontos (LaFlamme,1997). Todos passaram por avaliação veterinária prévia para garantir boa saúde e ausência de dermatoses. Os cães foram alojados individualmente e alimentados duas vezes ao dia, conforme a necessidade energética de manutenção (NEM = 110 X peso corporal) (NRC, 2006), e água ad libitum. O estudo utilizou um delineamento cross- over com duas dietas: 1) farinha de mosca soldado negro (BSFL); 2) farinha de subproduto de aves (SPA), ambas formuladas para atender às necessidades nutricionais de cães adultos, diferindo principalmente na fonte proteica (tabela 1). Cada período durou 50 dias, com um período de washout de 7 dias entre eles.
Foram realizadas análises sanguíneas nos dias 0 e 50 de cada período, incluindo contagem de células sanguíneas e análises bioquímicas para avaliar aminotransferase sérica, alcalina fosfatase, creatinina, nitrogênio ureico sanguíneo, colesterol sérico, triglicerídeos, lipoproteína de densidade muito baixa, lipoproteína de baixa densidade, e lipoproteína de alta densidade, e para os parâmetros da capacidade antioxidante (malondialdeido, capacidade antioxidante total, DPPH, e vitamina E), além da avaliação adicional das amostras séricas na coleta do dia 50 da atividade das enzimas redox: superóxido dismutase; catalase; glutationa transferase; glutationa e peroxidação lipídica.
A avaliação da pele e pelagem foi realizada através da avaliação subjetiva, nos dias 0 e 50 de cada período, seguindo a escala de qualidade proposta por Rees (2001) e uma média das quatro avaliações feitas em cada cão e em cada momento do estudo foi utilizada para análise estatística. A integridade e função da barreira cutânea foram avaliadas nos dias 0, 15, 30 e 45, através da medição da perda de água transepidérmica (TEWL) e da hidratação do estrato córneo (SCH) usando o dispositivo do tipo câmara fechada, onde cinco medidas foram coletadas (abdômen e pavilhão auricular) e uma média foi utilizada para análise. Três mensurações sucessivas foram realizadas, e o valor médio foi calculado.
As análises estatísticas foram realizadas para todas as variáveis, verificando a distribuição normal pelo teste de Shapiro-Wilk. Foram utilizados testes de Mann- Whitney U e Kruskall Wallis, para variáveis não-paramétricas, enquanto a ANOVA pelo teste T foi empregada para dados de hematologia e enzimas redox. Os parâmetros bioquímicos séricos e antioxidantes foram avaliados com um delineamento misto considerando dieta e tempo, assim como para a função da barreira cutânea. Comparações pós-hoc foram conduzidas com o teste de Tukey- Kramer, e as análises foram realizadas com o software SigmaPlot v.12.0, com um nível de significância de 5%.
Resultados
Foi possível produzir dieta extrusada com 29,5% de inclusão de farinha BSFL. Apesar das dietas terem sido formuladas para apresentarem os mesmos teores nutricionais, pequenas diferenças foram encontradas na composição analisada, provavelmente devido a pequenos desvios na especificação dos ingredientes. Todos os animais aceitaram bem as dietas, sem nenhum efeito adverso. O consumo alimentar médio durante o experimento foi de 26,03±3,23g e 25,77±3,82g/kg0,75/dia para as dietas SPA e BSFL, respectivamente.
Todos os parâmetros sanguíneos analisados neste estudo atingiram a faixa de referência normal e durante o período experimental, não foi observado efeito significante da dieta, tempo ou interação dieta*tempo. Os resultados dos parâmetros bioquímicos séricos obtidos alcançaram a faixa de referência para cães saudáveis e não apresentaram diferenças significativas para creatina, nitrogênio ureico sanguíneo, fosfatase alcalina, colesterol, lipoproteína de alta e muito baixa densidade para tempo, dieta e interação dieta*tempo. Houve interação significativa entre dieta e tempo foi observado para alanina aminotransferase (p=0,018), e aumentou significativamente na dieta BSFL em ambos os períodos (69,33±34,3U/L e 41±11,26U/L, respectivamente) quando comparadas com a SPA (40,25±23,65U/L e 51±26,2U/L, respectivamente). Triglicerídeos foram alterados significativamente pelo tempo (p=0,002), com um aumento significativo quando os animais consumiram SPA (59,14±17,8mg/dL, p=0,004). Uma interação significativa (p=0,017) entre dieta e período foi observado para lipoproteína de baixa densidade, que reduziu na dieta SPA no final do período (61,8±7,86mg/dL, p=0,037).
Na avaliação do sistema antioxidante não foi observado efeitos significativos para dieta, tempo ou interação para MDA, CAT e vitamina E (P<0,05). O DPPH foi afetado significativamente pelo fator tempo (p=0,008), reduzindo ao longo do tempo quando alimentados com a dieta SPA (38,78±8,6µM no T50), enquanto para a dieta BSFL não apresentou mudanças. Para as enzimas do sistema redox, os resultados não diferiram depois de 50 dias de consumo (P<0,05).
Uma interação significativa foi observada para condição de pelo (p=0,041). As análises post-hoc indicam que a pontuação da qualidade de pelo aumentou no grupo BSFL de 2,87±0,64 para 3,51±0,75 (p=0,030), com melhora na maciez e brilho. A pontuação da condição da pele foi similar entre as dietas e permaneceu a mesma durante todo o estudo (P>0,05). Nos resultados da função da barreira (figura 1), foi observada uma interação significativa para TEWL (g/m2/h) (p=0,035) e reduziu significativamente no grupo TEWL (p=0,006) depois de 30 dias de consumo da dieta, e este parâmetro foi significativamente diferente para as dietas SPA e BSFL no T30 (p=0,024) e T45 (p=0,018) com redução da TEWL em cães alimentados com BSFL no pavilhão auricular. Um efeito significativo de dieta p=0,025) também foi observado no abdômen. A TEWL no grupo BSFL foi menor do que no SPA no T30 (p=0,004) e T45 (p=0,047). Uma interação significativa entre dieta e tempo foi observada para SCH (a. u) no abdômen (p=0,003), com valores mais altos no grupo BSFL comparadas com o SPA no T15 (p=0,005), T30 (p=0,011) e T45 (p<0,001). O efeito intragrupo indicou que a SCH melhorou em cães alimentados com BSFL no T30 (p=0,046) e T45 (0,012). Este parâmetro na região do pavilhão auricular foi semelhante entre dietas e não afetou através do tempo.
Discussão
A BSFL é um ingrediente promissor na indústria de alimentos para animais de estimação, sendo sustentável e com concentrações significativas de proteínas e lipídeos, além de propriedades funcionais (Kotob et al., 2022; Jian et al., 2022). Este estudo confirma que o consumo de dietas com alta inclusão de farinha de BSFL é seguro para cães adultos, sem déficits nutricionais (Freel et al., 2021; Jian et al., 2022). Após 50 dias de consumo da dieta com BSFL, não foram observadas alterações negativas nos parâmetros sanguíneos em cães saudáveis. Entretanto, foram observadas alterações significativas em alguns parâmetros bioquímicos, como alanina aminotransferase, triglicerídeos e lipoproteína de baixa densidade, que podem ser atribuídas às diferentes características e composições dos ácidos graxos presentes nas fontes proteicas avaliadas, principalmente os ácidos graxos de cadeia média (Bach et al., 1996; Trevizan et al., 2010; Jian et al., 2022). A capacidade antioxidante deste ingrediente, embora não tenha sido observada na análise do DPPH, foi destacada em estudos anteriores (Mouithys-Mickalad et al., 2020), sugerindo um efeito positivo na saúde do fígado e na redução do estresse oxidativo (Kim et al., 2017; Nahle et al., 2022). A dieta BSFL também teve impacto na melhoria da barreira cutânea dos cães, reduzindo a perda de água transepidérmica e aumentando a hidratação do estrato córneo, o que pode ser atribuído aos ácidos graxos presentes na dieta, como o ácido linoleico (efeito benéfico já conhecido na literatura) e láurico, que além de ser um componente do sebo da pele, é um ácido graxo importante na manutenção dos microrganismos benéficos e saúde da pele (Nakatsuji et al., 2010; Momota et al., 2016; Siddiqui et al., 2023). Além disso, a dieta promoveu melhoras na qualidade da pelagem, aumentando o brilho e maciez, indicando uma possível melhoria na produção sebácea e hidratação do pelo. Estudos futuros são necessários para explorar mais a fundo o papel da larva de mosca soldado negro na saúde da pele e na qualidade da pelagem, especialmente em cães com pele sensível ou com desordens cutâneas.
Conclusão
Esta pesquisa traz resultados da avaliação da dieta contendo BSFL em cães saudáveis. A inclusão deste ingrediente como fonte principal de proteína na dieta seca não promoveu impacto negativo através do consumo da dieta BSFL na saúde, apresentou efeitos antioxidantes benéficos e houve melhora na função da barreira e qualidade cutânea. Isso sugere que este ingrediente pode ser uma alternativa viável para substituir ingredientes proteicos e lipídicos tradicionais em dietas para cães, especialmente aqueles com pele sensível.
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